荧光假单胞菌2P24中RstA蛋白的功能鉴定

• 作者: 何永兴 李坤 李妙慧 李谛音 王志平 韩建庭
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 荧光假单胞菌2P24 RstA蛋白 外排泵 多重耐药性
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 99-106
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0097

摘要

探究荧光假单胞菌2P24中OmpR家族转录因子RstA的功能,明确其对EmhABC外排泵的调控作用及机制.利用共适应分析预测RstA的潜在功能;采用同源重组技术构建rstA、emhABC基因缺失菌株 ΔrstA和 ΔemhABC,检测野生型、ΔrstA、ΔemhABC对多种抗生素的敏感性;通过qRT-PCR和 β-半乳糖苷酶实验检测emhABC在野生型和 ΔrstA菌株中的转录、表达水平;表达纯化His-RstA蛋白并经凝胶阻滞实验检测RstA蛋白与emhABC基因启动子区域的结合活性.结果显示,RstA同EmhABC存在共适应性,并预测RstA与多种抗生素胁迫环境的适应相关;ΔrstA和 ΔemhABC对多种抗生素耐受性下降;与野生株相比,突变株 ΔrstA中emhABC的转录、表达水平均下降超过3倍;成功表达纯化His-RstA蛋白,经凝胶阻滞实验显示重组His-RstA蛋白可与emhABC基因启动子区域特异性结合.OmpR家族转录因子RstA通过结合在emhABC上游启动子区域正向调控EmhABC的表达,并影响荧光假单胞菌2P24的多重耐药性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志平	兰州大学第二医院泌尿外科甘肃省泌尿系疾病研究重点实验室	100	208	8.0	9.0
2	李坤	兰州大学第二医院泌尿外科甘肃省泌尿系疾病研究重点实验室	11	59	4.0	7.0
3	李谛音	兰州大学第二医院泌尿外科甘肃省泌尿系疾病研究重点实验室	2	0	0.0	0.0
4	何永兴	兰州大学生命科学学院细胞活动与逆境适应教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	韩建庭	兰州大学生命科学学院细胞活动与逆境适应教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
6	李妙慧	四川大学华西临床医学院	1	0	0.0	0.0