拟穴青蟹保幼激素酯酶结合蛋白(JHEBP)基因的克隆与表达分析

• 作者: 张凤英 王伟 蒋科技 赵俊霞 赵明 马凌波 马春艳
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 拟穴青蟹 甲基法尼酯 保幼激素酯酶结合蛋白 保幼激素酯酶 基因表达
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1086-1095
• 页数: 10页
• 分类号: S917
• 字数: 5999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2019.18435

摘要

甲基法尼酯(MF)是甲壳类的保幼激素(JH),MF的代谢可能主要由保幼激素酯酶(JHE)催化完成,保幼激素酯酶结合蛋白(JHEBP)能紧密结合JHE,在JHE的代谢中具有重要作用,研究JHEBP对于MF降解通路的探究具有一定促进作用.本研究获得了拟穴青蟹JHEBP基因的cDNA全序列,命名为Sp-JHEBP.Sp-JHEBP序列全长为1647 bp,包含一个891 bp的开放阅读框(ORF),可编码296个氨基酸,预测相对分子质量33.79 kD,等电点8.63.利用Target P预测Sp-JHEBP定位于线粒体,Mitoprot预测Sp-JHEBP的前31个氨基酸组成的肽段为线粒体定位信号肽.多重序列比对分析发现,Sp-JHEBP的氨基酸序列与多齿新米虾(Neocaridina denticulata)的一致度最高(67％),其次为黑脉金斑蝶(Danaus plexippus)(43％).系统发育树分析JHEBP与物种分化并不一致,这表明JHEBP随着物种分化,功能上可能也出现了分化.Sp-JHEBP在所检测的9个组织中均有表达,在卵巢中的表达量远高于其它组织,其次是鳃、血淋巴、肝胰腺.在幼体发育过程中,Sp-JHEBP在受精卵时期最高,从Z1至Z5期逐渐升高,到Z5期达到最高,随后逐渐下降到C1期.体外处理MF和法尼酸(FA)显示Sp-JHEBP受高浓度MF上调,在0.1～5μmol/L之间随着FA浓度升高Sp-JHEBP表达量升高.综合分析我们认为Sp-JHEBP可能通过降解JHE来参与MF的代谢,该研究结果对青蟹MF降解分子网络的研究具有一定的推动作用.