一种改良的拟南芥原生质体的制备和转化方法

• 作者: 刘姣姣 史勇 王林会 金维环 陈彦惠
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 拟南芥 原生质体 转化 改良 叶肉细胞
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 147-152,170
• 页数: 7页
• 分类号: Q503
• 语种: 中文

摘要

[目的]为了降低拟南芥原生质体制备的试验成本, 缩短制备时间, 降低转化所用质粒的浓度和提高转化效率.[方法]实验以胶带法为基础, 比较多种普通胶带去除拟南芥叶片下表皮的效果, 通过增加裂解叶片用量, 设计不同质粒浓度梯度转化原生质体, 调整转化过程中PEG处理时间和对原生质体进行暗培养.[结果]发现普通纸质和布质胶带去除拟南芥叶片下表皮效果良好.将叶片酶解时间缩短到20～30 min, 转化质粒用量降低到5μg/6～10×104个原生质体;将PEG转化处理时间延长到30 min, 利用暗培养降低了原生质体死亡率;用冰水混合物保存原生质体, 24 h内不影响转化效率.[结论]改良后的胶带法制备原生质体成本低、用时短、转化效率高、可操作性强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈彦惠		81	1071	20.0	29.0
2	金维环		4	3	1.0	1.0
3	史勇		2	3	1.0	1.0
4	刘姣姣		1	0	0.0	0.0
5	王林会		1	0	0.0	0.0