柔嫩艾美耳球虫AMA1基因DNA疫苗的免疫保护效果

• 作者: 姜连连 朱顺海 王晔 舒凡帆 董辉 薛璞 赵其平 韩红玉 黄兵
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柔嫩艾美耳球虫 AMA1基因 真核表达 免疫保护效果
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-9
• 页数: 9页
• 分类号: S852.723
• 字数: 6407字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在评价表达柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)顶膜抗原1(Apical membrane antigen 1,EtAMA1)基因的DNA疫苗对雏鸡柔嫩艾美耳球虫人工感染的免疫保护效果.将EtAMA1基因和鸡IFN-γ基因插入真核表达载体pCAGGS中,分别构建了真核表达重组质粒pCAGGS-EtAMA1和pCAGGS-EtAMA1-IFN-γ.将重组质粒pCAGGS-EtAMA1转染进293T细胞中,经间接免疫荧光和Western blot实验鉴定,观察其在体外表达情况.将pCAGGS-EtAMA1和pCAGGS-EtAMA1-IFN-γ于7日龄和14日龄腿部肌肉注射免疫雏鸡,21日龄人工感染1×104个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,第29日龄时处死试验鸡,以平均增重、卵囊产量和病变记分来评价重组质粒的免疫保护效果.结果显示,pCAGGS-EtAMA1转染的293T细胞出现明显的红色荧光;两种真核表达重组质粒免疫组鸡的平均增重与未攻虫组的平均增重差异不显著,不具有统计学意义,而未免疫攻虫组则与未攻虫组在增重方面差异具有显著统计学意义;免疫组鸡相较于未免疫攻虫组在病变记分方面显著下降;免疫组的卵囊减少率分别为67.43％和72.89％;pCAGGS-EtAMA1-IFN-γ组在增重、盲肠病变记分和卵囊减少率方面都优于pCAGGS-EtAMA1组,但差异不具有统计学意义.表明构建的2种重组质粒对雏鸡柔嫩艾美耳球虫感染有一定的免疫保护效果.