噬菌体phi29末端酶gp16蛋白C端结构域在溶液中的构象分析

• 作者: 张云龙 武飞飞 蔡汝洁 陆昌瑞 陈婷
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 噬菌体phi29 gp16蛋白 C端结构域 X射线小角散射
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 305-312
• 页数: 8页
• 分类号: Q518.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16476/j.pibb.2018.0235

摘要

噬菌体phi29是一种双链DNA病毒,它的增殖和成熟过程需要将较大的子代DNA包装入一个空间极其有限的新生病毒衣壳中,这一步骤由其转运马达完成.转运马达具有三个部分:头颈连接器蛋白(the connector)、pRNA和ATP水解酶蛋白(gp16).在结构预测中发现gp16蛋白的C端结构域可能与pRNA或DNA结合,但尚未有相关文献可以证明这种相互作用,因此其结构的解析成为研究其功能的关键.本文利用大肠杆菌SUMO表达系统,对噬菌体phi29 gp16蛋白的C端结构域进行重组构建并诱导表达后,通过Ni-NTA亲和层析纯化,再用分子排阻色谱获得高纯度的目的蛋白质单体,纯度达到95％左右.最后用X射线小角散射技术(small angle X-ray scattering)对其构象进行分析,收集小角散射数据,当目的蛋白的浓度为1.3 g/L、所得到的目的蛋白的三维结构与同源蛋白FtsK的晶体结构高度拟合,且通过CRYSOL软件反推计算的曲线与实验曲线高度重合.通过原核表达、纯化及结构分析,成功获得了该结构域在溶液中的状态信息.这一研究不仅为后续关于该结构域的功能研究奠定基础,也为病毒感染的诊断和治疗提供新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈婷		41	135	7.0	10.0
2	陆昌瑞		16	3	1.0	1.0
3	张云龙		21	27	4.0	5.0
4	蔡汝洁		4	0	0.0	0.0
5	武飞飞		1	0	0.0	0.0