基于定量蛋白质组学技术的铬致细胞恶化转化中SET的潜在作用分析

• 作者: 任晓虎 刘云岗 刘建军 王舒奇 罗暖媛 陈志鸿 黄超
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: 定量蛋白质组学 六价铬 人支气管上皮样细胞 SET蛋白
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 169-173
• 页数: 5页
• 字数: 3162字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2019.03.002

摘要

目的 分析六价铬[Cr(Ⅵ)]诱导人支气管上皮样细胞(16HBE细胞)恶性转化中蛋白表达谱改变及差异蛋白SET的表达水平,为研究Cr(Ⅵ)致癌的分子机制提供新的线索.方法 以Cr(Ⅵ)诱导恶性转化的16HBE细胞为研究对象,提取总蛋白并经烷基化、脱盐,最后酶解为肽段,用Tandem Mass Tag(TMT)进行标记,利用液相色谱-电喷雾质谱(LC-ESI-MS/MS)对标记肽段进行鉴定及相对定量;通过Western blot验证差异表达蛋白SET,并检测其下游分子的表达水平.利用在线分析网站Https://david.ncifcrf.gov对差异蛋白进行基因富集分析.结果 LC-ESI-MS/MS共鉴定3 517个蛋白,上调蛋白185个、下调蛋白201个;基因富集分析发现,差异蛋白主要参与细胞自噬、DNA损伤修复、RNA加工等多个生物学过程;Western blot结果显示,与对照组比较,SET蛋白表达水平上调(P＜0.05),SET下游分子H3K18ac、H3K 27ac和p53的表达水平均呈下降趋势,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Cr(Ⅵ)诱导16HBE细胞恶性转化过程中涉及多个生物学过程的蛋白发生改变,SET可能通过抑制H3K18ac、H3K 27ac水平介导p53转录活性的调控模式在Cr(Ⅵ)致癌中发挥重要作用.