白花蛇舌草通过抑制RAP1-JNK信号通路选择性促进人肾癌ACHN细胞间质-上皮转化

• 作者: 何小珍 刘培峰 刘永忠 周雁 张元亮 邹寒冰
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 肾肿瘤 白花蛇舌草 上皮-间质转化 细胞运动 RAP1-JNK信号通路
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 235-248
• 页数: 14页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2019.11.879

摘要

目的:研究白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd,HDW)对人肾癌细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:人肾细胞腺癌ACHN和人肾近曲小管HK-2细胞经HDW处理24h后,采用CCK-8法检测HDW对ACHN和HK-2细胞增殖的影响,FCM法检测HDW对细胞周期和凋亡的影响.光学显微镜下及罗丹明染色法观察HDW处理对ACHN和HK-2细胞形态的影响;采用免疫荧光染色法和蛋白质印迹法检测间质-上皮转化(mesenchymal-epithelial transition,MET)相关蛋白表达的变化.划痕愈合实验和Transwell小室法检测ACHN和HK-2细胞的迁移和侵袭能力,RNA测序法检测HDW对ACHN细胞转录组的影响;实时荧光定量PCR法检测RAP1信号通路相关基因RAP1GAP、RASGRP2、RAPGEF3、MAGI1及GNAI1 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法检测丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activate protein kinase,MAPK)通路相关蛋白c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、磷酸化JNK (phospho-JNK,p-JNK)、蛋白激酶B(protein kinaseB,PKB,又称Akt)、磷酸化Akt (phospho-Akt,p-Akt)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)和磷酸化ERK (phospho-ERK,p-ERK)表达水平的改变.结果:HDW可选择性抑制ACHN细胞增殖(P＜0.01),将细胞周期阻滞于S期(P＜0.01),诱导细胞凋亡(P＜0.01).HDW处理后ACHN细胞的形态发生了明显变化,HDW可促进ACHN细胞中E-钙黏蛋白1 (E-cadherin 1)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达,并抑制波形蛋白(Vimentin)和Snail1的表达(P值均＜0.01).HDW能显著抑制细胞的迁移和侵袭能力(P值均＜ 0.01),且ACHN和HK-2细胞之间没有明显差异.RNA测序结果分析显示,HDW可影响细胞周期相关基因以及控制细胞生长的转录因子E2F和Myc靶基因的表达,并激活p53信号通路;HDW可显著下调ACHN细胞中RAP1GAP、RASGRP2、RAPGEF3、MAGI1及GNAI1 mRNA (P值均＜0.000 1)和p-JNK蛋白的表达水平.结论:HDW可能通过抑制RAP1-JNK信号通路来选择性抑制肾癌细胞ACHN的增殖,促进ACHN细胞MET、周期阻滞和凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张元亮		4	0	0.0	0.0
2	刘永忠		6	11	1.0	3.0
3	邹寒冰		6	15	2.0	3.0
4	刘培峰		6	10	1.0	3.0
5	何小珍		2	0	0.0	0.0
6	周雁		2	0	0.0	0.0