基于CRISPR-Cas9基因编辑技术创制大豆gmnark超结瘤突变体

• 作者: 关跃峰 厉苏宁 孙嘉丰 柏梦焱 袁珏慧
• 来源期刊: 大豆科学
• 关键词: 大豆 基因编辑 结瘤自我调节机制 移码突变
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 525-532
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2019.04.0525

摘要

为研究豆科作物结瘤自我调节机制(autoregulation of nodulation,AON)的作用机理,运用CRISPR-Cas9基因编辑技术创制大豆品种华春6号超结瘤gmnark突变体,设计3条靶向目的基因GmNARK的特异sgRNA,构建CRISPR-Cas9敲除载体.通过毛根转化试验选取sgRNA-B和sgRNA-C两条编辑效率较高的sgRNA用于大豆稳定转化,在T1代筛选出8种不同突变类型的突变体,在T2代通过营养液水培试验证明其中5种突变体有超结瘤的表型.选取gmnark-A突变体作进一步表型分析,发现其具有超结瘤、植株矮小和叶片深绿的表型.本研究所创制的gmnark突变体是研究AON途径作用机制与根瘤发育的重要遗传材料,同时此新种质资源具有作为“绿肥”与其它作物进行间作或轮作的巨大潜力.