基于基因芯片的荧光分析方法在甲状腺乳头状癌相关BRAFV600E突变高灵敏及特异性检测中的应用

• 作者: 孟宪瑛 王振新 王瑶琪 高嘉雪 魏佳
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 甲状腺乳头状癌 BRAFV600E突变 DNA芯片
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 855-861
• 页数: 7页
• 字数: 3159字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19756/j.issn.0253-3820.191149

摘要

研发了一种基于DNA芯片(DNA microarray)的荧光分析方法,并将其用于检测甲状腺乳头癌相关的BRAFV600突变.本方法采用三链杂交体系,首先将单链DNA(ssDNA)捕获探针固定在微阵列芯片基底上,制备DNA芯片;以其为反应平台,加入ssDNA目标物与ssDNA捕获探针进行杂交;最后加入荧光分子Cy5的修饰ssDNA标记ssDNA目标物,检测荧光信号.在优化的实验条件下,本方法对BRAFV600E突变型ssDNA目标物的检测灵敏度达到亚纳摩尔级(0.25 nmol/L),且具有3个数量级的线性范围,并能够从突变型ssDNA目标物和野生型ssDNA目标物的混合物中区分出低至0.1％ 的BRAFV600E突变型ssDNA目标物.利用本方法对15例临床甲状腺组织样本的BRAFV600E突变水平进行了分析,实验结果与常规Sanger测序法检测结果一致,表明本方法具有良好的实用性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王振新	中国科学院长春应用化学研究所电分析化学国家重点实验室	35	211	8.0	13.0
2	魏佳	吉林大学白求恩第一临床医院甲状腺外科	6	17	2.0	4.0
3	孟宪瑛	吉林大学白求恩第一临床医院甲状腺外科	46	177	8.0	10.0
4	王瑶琪	吉林大学白求恩第一临床医院甲状腺外科	5	19	2.0	4.0
5	高嘉雪	中国科学院长春应用化学研究所电分析化学国家重点实验室	2	2	1.0	1.0