多药耐药1基因法尼醇促氟康唑耐药白念珠菌凋亡机制初探

• 作者: 周罗成 康健 张姣姣 朱莹莹 王宁 王海嵘
• 来源期刊: 内科理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 法尼醇 白念珠菌 多药耐药1基因过表达
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 366-370
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 字数: 4508字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16138/j.1673-6087.2019.06.007

摘要

目的:进一步研究多药耐药1(multidrug resistance 1,MDR1)基因过表达在法尼醇促进氟康唑耐药白念珠菌凋亡过程中的机制.方法:从美国国家生物技术信息中心搜索获得MDR1基因的mRNA,利用双酶切法将MDR1基因的ORF插入质粒pCaEXP的MET3启动子后面,构建可过表达MDR1基因的pCaEXP-MDR1重组质粒.利用醋酸锂法将重组质粒转染至白念珠菌,制备MDR1过表达的白念珠菌作为实验组,转染pCaEXP空质粒的白念珠菌作为对照组.在2组中加入200 μmol/L浓度的法尼醇培养后,采用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测2组生长曲线,应用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测并比较2组菌株的胱天蛋白酶3 (caspase 3)的活化程度,菌株内谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量及细胞内活性氧类(reactive oxygen species,ROS)含量,进而比较不同组菌株在细胞凋亡、细胞内氧化还原及氧化应激水平上的差异.结果:与对照组比较,加入法尼醇后,MDR1过表达的实验组白念珠菌的繁殖生长曲线明显下降,其差异在24h后有统计学意义(P=0.039 2).实验组细胞内还原型GSH的含量(P=O.000 1)及氧化型GSH含量(P=0.004 4)下降,ROS含量(P=0.003 8)及胱天蛋白酶3活性(P=0.029 0)上升.结论:MDR1表达的增加使法尼醇显著减少白念珠菌细胞内GSH的含量,增加细胞内ROS含量,细胞抗氧化能力下降,胱天蛋白酶3活性增加,促使白念珠菌凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	康健	上海交通大学医学院附属新华医院急诊医学科	40	104	6.0	9.0
2	王宁	上海交通大学医学院附属新华医院急诊医学科	113	669	13.0	24.0
3	王海嵘	上海交通大学医学院附属新华医院急诊医学科	66	232	9.0	12.0
4	朱莹莹	上海交通大学医学院附属新华医院急诊医学科	9	8	2.0	2.0
5	周罗成	上海交通大学医学院附属新华医院急诊医学科	8	7	1.0	2.0
6	张姣姣	上海交通大学医学院附属新华医院急诊医学科	3	0	0.0	0.0