摘要:
随着山羊(Capra hircus)产品需求的增加,山羊异地运输增多,运输应激会引起山羊体重和肉质下降、免疫力降低、引发疾病甚至死亡,运输过程中山羊的管理情况将直接影响盈利水平和动物福利.本研究针对运输应激对山羊肝脏和肾脏显微和超微结构及热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)表达的影响进行探讨.实验随机选取了12只健康赣西公山羊随机分为对照组、2h运输应激组和6h运输应激组3组,采用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)、透射电镜技术、免疫组织化学和蛋白质印迹(Western blot)技术,分析不同运输时间山羊肝脏、肾脏的损伤程度以及HSP27、HSP70和HSP90在其中分布和表达情况.显微与超微观察结果显示运输应激组山羊肝脏、肾脏均发生不同程度的损伤,肝脏中肝细胞出现明显的颗粒和水泡变性,部分细胞胞核染色质聚集,肾脏中肾小管和集合小管结构崩解,肾小球充血肿胀明显,肾小囊腔变窄,并且二者细胞中的线粒体肿大变形、嵴断裂消失,数量减少,甚至部分线粒体因肿胀、空泡化导致膜结构裂解.其中6h运输应激组更为严重,部分肝细胞出现核溶解现象,管腔和肾小球细胞损伤程度也更加严重.免疫组织化学结果显示,肝脏中3种HSP主要在中央静脉和门管区附近的肝细胞胞质中表达,而肾脏中主要在肾小管和集合小管表达,在运输应激组表达更强.此外,HSP27在运输应激组肝脏中血管内皮、胆小管细胞和肾小体处也出现较强的阳性结果.Western blot分析结果显示在肝脏和肾脏中2和6h运输应激组间,对比3种热休克蛋白表达量无显著差异(P>0.05),且肝脏中HSP90表达量在运输组与对照组间无明显变化(P>0.05).在肝脏中2和6h运输应激组HSP27和HSP70表达量分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)高于对照组;在肾脏中2和6h运输应激组HSP27和HSP90蛋白表达量都极显著(P<0.01)高于对照组,并且肾脏中HSP70表达量在2和6h运输应激组分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)高于对照组.总之,运输应激对山羊肝脏、肾脏造成了较严重的病理损伤,并且随着运输时间的延长损伤加剧,3种热休克蛋白在肝脏、肾脏中分布有所不同,山羊肝脏、肾脏的HSP27和HSP70表达量在运输应激后均明显升高,提高了肝肾细胞的抗逆性.本研究为山羊运输应激的解决方案提供了一定的理论依据.