CHAC1基因沉默SU-DHL-8细胞株的构建 及其对青蒿素细胞毒活性的影响

• 作者: 何丽囡 尹俊林 曾广智 杨春菊 樊保敏 王宁
• 来源期刊: 云南民族大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 弥散性大B细胞淋巴瘤 青蒿素 CHAC1 转染 基因沉默
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 民族药
• 页码范围: 313-319
• 页数: 7页
• 分类号: Q943.2|R285.5
• 字数: 4585字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8513.2019.04.001

摘要

应用慢病毒短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)转染的方式构建了阳离子转运蛋白样蛋白1(cation transport regulator-like protein 1,CHAC1)基因沉默SU-DHL-8细胞株模型,用于研究CHAC1基因对青蒿素细胞毒活性的影响.研究了青蒿素对弥散性大B细胞淋巴瘤SU-DHL-8细胞增殖的抑制作用及作用后CHAC1基因及蛋白的表达情况.应用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默SU-DHL-8细胞株内的CHAC1基因.采用慢病毒转染的方法构建CHAC1基因沉默的SU-DHL-8细胞株.采用实时荧光定量核酸扩增检测系统(real-time quantitative PCR detecting system,qPCR)、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)活性测定法和蛋白免疫印迹(Westen blot)的方法检测沉默效果以及CHAC1基因对青蒿素细胞毒活性的影响.成功构建了稳定沉默CHAC1基因的稳转细胞株,并初步探讨了CHAC1基因对青蒿素抑制弥散性大B细胞淋巴瘤SU-DHL-8细胞增殖的影响.