树鼩肺成纤维细胞的分离、鉴定和传代培养

• 作者: 仝品芬 代解杰 匡德宣 孙晓梅 李娜 王文广 罕园园 陆彩霞
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 树鼩 肺成纤维细胞 鉴定 传代培养
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 105-110
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.02.007

摘要

目的 建立适用于树鼩肺成纤维细胞的分离、鉴定和传代培养方法.方法 分别采用组织块贴壁培养法和胰酶消化法,分离培养新生树鼩肺成纤维细胞,通过倒置显微镜观察细胞生长情况,用波形蛋白(Vimentin)对分离的成纤维细胞进行免疫荧光鉴定;传代培养并开展冻存复苏实验,采用MTS法绘制细胞生长曲线,以人胚肺二倍体成纤维细胞(KMB-17)作对照.结果 通过组织块贴壁培养法和胰酶消化法均可获取树鼩肺成纤维细胞,细胞主要呈现梭形,波形蛋白免疫荧光鉴定普遍呈阳性,与KMB-17一致.树鼩肺成纤维细胞可连续传代4～5次,经冻存复苏后细胞仍能保持活力,以5×104细胞/mL的密度传代,细胞可在3d左右进入对数生长期.结论 组织块贴壁培养法和胰酶消化法均可有效获取树鼩的肺成纤维细胞,可为肺部相关疾病的体外研究提供实验材料.