苹果轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)果胶裂解酶基因Bdpl1的致病功能分析

• 作者: 习慧君 刘闯 尹新明 文才艺 洪坤奇 臧睿 赵莹
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 苹果轮纹病菌 果胶裂解酶 基因敲除 qRT-PCR
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 314-325
• 页数: 12页
• 分类号: S436.611
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000291

摘要

由葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)引起的苹果轮纹病是影响我国苹果安全生产的重大病害之一.因此,本研究基于受苹果轮纹菌侵染的苹果组织中果胶裂解酶基因Bdpll表达上调这一现象,通过Split-marker PCR技术构建Bdpll基因敲除载体,并通过PEG介导的原生质体转化获得转化子,经常规PCR和qRT-PCR对所获得的转化子进行筛选,成功获得1个Bdpll基因缺失阳性突变子.该转化子在PDA上的培养基性状与野生型没有明显差异,但在果胶培养基上菌落直径明显小于野生型.其胞外果胶酶活相比野生型明显下降,但在离体“早富”苹果枝条上的致病力并没有明显的下降.通过qRT-PCR技术发现在基因Bdpl1敲除后,其家族内有3个基因在病菌侵染过程中相比野生型明显上调表达(＞3倍).这些现象表明果胶裂解酶基因Bdpl1与病原菌的营养生长过程关系不大,但其参与对寄主果胶类物质的降解.Bdpl1基因对轮纹病菌致病力的影响较小,有可能是Bdpl1基因敲除后,该基因家族内其他基因的上调表达补偿了Bdpll基因的功能.