缓激肽生物合成及其对心肌细胞缺氧复氧保护作用

• 作者: 张梦 张美娴 戴毅 方佳炜 朱焘 杨静 王中山 陈淑漫
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 缓激肽 心肌细胞 GFP 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 343-347,381
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.04.0058

摘要

[目的]获得有活性的缓激肽药物,探讨缓激肽在心肌细胞缺氧复氧过程中的保护作用.[方法]利用PCR方法构建pWaldo-BK质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株,优化诱导剂IPTG浓度和表达温度;利用镍柱亲和层析和分子筛纯化缓激肽融合蛋白质,利用GFP荧光In-gel检测蛋白质的表达情况;构建心肌细胞缺氧复氧模型,检测缓激肽对细胞的保护作用.[结果]成功构建pWaldo-BK表达载体,0.2 mmol/L IPTG于25℃诱导培养20h,能够获得高表达的目标蛋白质;In-gel荧光检测证实,融合蛋白GFP能够发出绿色荧光;心肌细胞缺氧复氧模型证实缓激肽能够有效保护心肌细胞.[结论] 0.2 mmol/L IPTG、25℃诱导表达20 h,得到散发绿色荧光的融合蛋白,每1L BL21 (DE3)细胞培养基能够获得缓激肽约0.55 mg,且最终获得的缓激肽能够有效保护心肌细胞对抗缺氧复氧刺激.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王中山		6	3	1.0	1.0
2	张梦		4	3	1.0	1.0
3	张美娴		2	0	0.0	0.0
4	陈淑漫		2	0	0.0	0.0
5	朱焘		2	0	0.0	0.0
6	方佳炜		3	0	0.0	0.0
7	杨静		8	1	1.0	1.0
8	戴毅		2	0	0.0	0.0