小桐子SnRK1蛋白激酶α亚基基因的克隆及原核表达分析

• 作者: 王海波 田雪莲 郭俊云
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 小桐子 蛋白激酶 SnRK1 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 39-47
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0948

摘要

植物蔗糖非发酵-1型相关蛋白激酶1(Sucrose non-fermenting-1 related protein kinase 1,SnRK1)与酵母SNF1及哺乳动物AMPK同属进化上保守的SNF1蛋白激酶家族,参与响应由胞内低能量/低糖状态所引起的信号转导过程.基于小桐子基因组数据,利用生物信息学方法鉴定到小桐子SnRK1蛋白激酶 α 亚基基因,并克隆到该基因的全长cDNA序列,命名为JcSnRK1α.结果表明,该cDNA序列全长1700 bp,完整开放阅读框1545 bp,编码514个氨基酸,分子量为58.8 kD,理论等电点为8.57.基因结构显示,其包含11个外显子与10个内含子.具有包含T-loop区域的激酶结构域、自抑制调控结构域UBA及激酶相关结构域KA1.另外,在该基因启动子序列中鉴定到TATA框、CAAT框及响应高温、低温、干旱、创伤、赤霉素等应答元件.qRT-PCR分析显示,小桐子JcSnRK1α 基因具有器官表达特异性,在茎与根中表达量较高,而在叶片中表达量相对较低,同时,在茎与根中都属于低温诱导表达基因,分别在低温胁迫3 h与0.5 h达到最大表达量,较对照提高2.04与3.16倍.构建其原核表达载体pGEX-4T-1-JcSnRK1α,并在Rosetta中诱导表达,得到84.8 kD的蛋白条带,与理论融合蛋白的分子量一致.本研究为开展小桐子JcSnRK1α 基因的功能鉴定以及其在信号转导与逆境应答中的机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田雪莲	曲靖师范学院生物资源与食品工程学院	13	30	3.0	5.0
2	王海波	曲靖师范学院云南高原生物资源保护与利用研究中心云南省高校云贵高原动植物遗传多样性及生态适应性进化重点实验室	21	75	5.0	8.0
3	郭俊云	曲靖师范学院生物资源与食品工程学院	5	29	2.0	5.0