基于UHPLC-MS/MS分析痕量芥子气染毒血样中血红蛋白加合物

• 作者: 于惠兰 刘昌财 刘石磊 吴姬娜 李晓森 杨旸 梁龙辉 陈博
• 来源期刊: 质谱学报
• 学科: 化学
• 关键词: 芥子气 人血红蛋白 组氨酸加合物 酶解 衍生 超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 质谱技术在蛋白质分析中的应用
• 页码范围: 305-313
• 页数: 9页
• 分类号: O657.63
• 字数: 5730字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7538/zpxb.2019.0003

摘要

芥子气可以与血红蛋白的组氨酸侧链发生反应,生成芥子气暴露染毒的生物标志物.本研究建立了定性、定量检测痕量芥子气暴露染毒人血红蛋白加合物的方法.采用2-氯乙基乙基硫醚(2-CEES)染毒的血红蛋白溶液作为内标,用链霉蛋白酶对芥子气-珠蛋白加合物进行酶解,经PPL柱固相萃取纯化以及苄氧羰基氯(Cbz-Cl)衍生,使用超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)进行分析检测.经过优化实验条件,最终选择链霉蛋白酶的酶解温度55℃,酶解时间10.0h,使用3.0mL5％甲醇水溶液淋洗,1.0 mL 50％甲醇水溶液洗脱,Cbz-Cl衍生时间30 min.结果 表明,在10.0～1 000 μg/L线性范围内,线性关系良好(R2＞0.997),准确度为89.8％～113％,精密度(RSD)不高于12.4％,检出限(LOD)为10.0 μg/L(S/N＞5).该方法采用2对离子对进行确证,有助于痕量芥子气暴露染毒的溯源性分析,与传统酸解法相比,该方法样品处理时间短,反应条件温和、操作简单,且灵敏度可提高约150倍.