伤寒沙门菌三基因敲除株的构建及其减毒效果分析

• 作者: 余明 刘璐 张丹 樊佳 熊坤 穆媛媛 赵容 邓冲 魏聪
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 伤寒 减毒株 基因敲除
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1919-1922
• 页数: 4页
• 分类号: R516.3
• 字数: 2232字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2019.11.031

摘要

目的 通过敲除伤寒沙门菌与体内生存相关的基因构建减毒株.方法 采用同源重组方法进行基因敲除,将涉及铁摄取的外膜转运蛋白编码基因iroN、fepA、cirA全部敲除.采用小鼠感染模型测定野生株和突变株的毒力水平,采用概率单位加权回归法计算半数致死量(LD50).结果 采用同源重组方法将3个基因一一敲除,成功构建三基因敲除株.贫铁培养基中的生长曲线显示突变株生长较野生株明显缓慢;以动物模型检测的毒力水平显示,野生株和突变株的LD50分别为3.64×10 CFU和3.56×106 CFU.结论 伤寒沙门菌外膜转运蛋白编码基因iroN、fepA、cirA敲除后病原菌毒力显著减低,为减毒疫苗的后续评价奠定了基础.