转化生长因子-β(TGF-β)空间动态分布的角膜基质创伤修复体外三维培养体系的构建

• 作者: 彭昶璠 徐路星 李霞 王霜宁 罗世男 袁检宝
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 角膜基质细胞 转化生长因子-β 三维培养 创伤修复 瘢痕化
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 311-315
• 页数: 5页
• 分类号: R772
• 字数: 5026字
• 语种: 中文

摘要

目的 研究构建模拟角膜基质创伤修复过程中转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)空间动态分布的体外三维培养系统.方法 从新鲜牛眼中分离角膜基质细胞,用含体积分数10％胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM/F12培养基进行培养,而后构建Pellet体外三维培养模型进行培养.将Pellet分为有透析袋组和无透析袋组,置入Transwell小室系统上下室中培养48 h后换液,上室为0.50 μg·L-1TGF-β1 +0.25μg·L-1TGF-β2+体积分数10％ FBS,下室为体积分数10％ FBS,分别于培养后72 h观察Pellet培养模型的形态变化并采用Real-time PCR法分别检测2组上下室Pellet中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)和ColⅢmRNA相对表达量.结果 培养后72 h Pellet均呈团状生长.有透析袋组Transwell小室系统上、下室α-SMA mRNA表达量分别为1.595±0.025、1.148±0.009,FN mRNA表达量分别为1.090±0.011、0.844±0.015,Col Ⅰ mRNA表达量分别为1.445±0.035、1.165±0.008,ColⅢmRNA表达量分别为1.726±0.031、1.314±0.020,ColⅢ/Col Ⅰ比值分别为1.126±0.019、0.957±0.013,上下室各项指标比较差异均有统计学意义(均为P=0.000).无透析袋组Transwell小室系统上、下室α-SMA mRNA表达量分别为1.363±0.018、1.360±0.002,FN mRNA表达量分别为0.946±0.017、0.952±0.012,Col Ⅰ mRNA表达量分别为1.261±0.011、1.258±0.029,ColⅢmRNA表达量分别为1.459±0.027、1.462±0.033,ColⅢ/Col Ⅰ比值分别为1.157±0.029、1.163±0.090,上下室各项指标比较,差异均无统计学意义(均为P＞0.05).无透析袋组上室细胞中α-SMA、FN、Col Ⅰ和ColⅢmRNA的相对表达量与有透析袋组上室、有透析袋组下室比较,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).无透析袋组下室细胞中α-SMA、FN、Col Ⅰ和ColⅢmRNA的相对表达量与有透析袋组上室、有透析袋组下室比较,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05).结论 Transwell小室系统与透析袋相结合可构建模拟TGF-β空间动态分布的体外三维培养系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李霞	广西医科大学第一附属医院眼科	75	301	9.0	12.0
2	王霜宁	广西医科大学第一附属医院眼科	3	1	1.0	1.0
3	罗世男	广西医科大学第一附属医院眼科	5	19	3.0	4.0
4	袁检宝	广西医科大学第一附属医院眼科	3	8	2.0	2.0
5	彭昶璠	广西医科大学第一附属医院眼科	1	0	0.0	0.0
6	徐路星	广西医科大学第一附属医院眼科	2	0	0.0	0.0