两种酶消化法对小鼠脑胶质瘤浸润性免疫细胞分离的影响

• 作者: 孙逊 杜铭 段瑾 王笑
• 来源期刊: 国际免疫学杂志
• 关键词: 小鼠胶质瘤 肿瘤浸润免疫细胞 流式细胞术 酶消化法
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 337-342
• 页数: 6页
• 字数: 4450字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4394.2019.04.001

摘要

目的 对比胰酶消化法和混合酶(Ⅱ型胶原酶+Ⅰ型DNA酶)消化法分离小鼠胶质瘤浸润免疫细胞的效果.方法 没有分组情况提取接种GL261胶质瘤细胞系21天后C57BL/6小鼠的脑组织,剪碎后A组用胰酶消化法,B组采用混合酶(Ⅱ型胶原酶+Ⅰ型DNA酶)消化法分别消化组织,通过Percoll密度梯度离心法获取肿瘤浸润免疫细胞,使用流式细胞术比较提取免疫细胞的表型特点.结果混合酶(Ⅱ型胶原酶+Ⅰ型DNA酶)消化法(B组)后,提取的小胶质细胞上CD11b的荧光强度比胰酶消化的A组强(P＜0.05);肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)、浸润的淋巴细胞、CD8+T细胞的比例和数量明显高于A组胰酶消化后得到的细胞(P＜0.05);CD4+T细胞的数量明显高于A组胰酶消化后得到的细胞(P＜0.05).结论 混合酶(Ⅱ型胶原酶 + Ⅰ型 DNA 酶)消化法得到的肿瘤浸润免疫细胞增多,细胞表面膜蛋白不受破坏,适用于对胶质瘤浸润免疫细胞的分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王笑	中国医科大学基础医学院免疫学教研室	6	26	3.0	5.0
2	段瑾	中国医科大学基础医学院免疫学教研室	1	0	0.0	0.0
3	杜铭	中国医科大学基础医学院免疫学教研室	1	0	0.0	0.0
4	孙逊	中国医科大学基础医学院免疫学教研室	5	5	1.0	2.0