八肋游仆虫组织蛋白酶B-1的克隆、表达和性质分析

• 作者: 刘婧妮 梁爱华 王软林
• 来源期刊: 山西大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 八肋游仆虫 组织蛋白酶B-1 基因克隆 表达纯化
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学与环境科学
• 页码范围: 427-434
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 字数: 5673字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13451/j.cnki.shanxi.univ(nat.sci.).2018.12.29.002

摘要

为研究八肋游仆虫中组织蛋白酶B(cathepsin B,CTSB)的生物学功能,选用组织蛋白酶β-1(EoCTSB-1)为研究对象,通过PCR扩增获得EoCTSB-1的基因.利用生物信息学软件分析表明八肋游仆虫CTSB-1基因全长为980 bp,不舍有内含子,开放阅读框为862 bp,编码286个氨基酸.氨基酸序列比对分析显示八肋游仆虫中组织蛋白酶B-1具有保守的催化活性位点,但缺少信号肽和封闭环结构.构建重组表达质粒pET30a-EoCTSB-1,并转入原核细胞中表达,经镍柱亲和层析以及变复性处理后获得较高纯度的EoCTSB-1蛋白,表达产物利用His-Tag的抗体进行western印迹检测,结果显示阳性.利用底物Z-Phe-Arg-AMC测得EoCTSB-1的最适温度为35℃,最适pH是5.0.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁爱华	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	97	555	13.0	18.0
2	王软林	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	13	2	1.0	1.0
3	刘婧妮	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	2	0	0.0	0.0