基于Sirt1-FXR通路探究京尼平苷酸对胆汁淤积大鼠胆汁酸肝肠循环的影响

• 作者: 俞浩 刘汉珍 李甲 胡蕾 赵威 陈浩 马世堂
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 京尼平苷酸 法尼醇X受体 去乙酰化酶1 胆汁淤积 肝肠循环
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 787-795
• 页数: 9页
• 语种: 中文

摘要

通过体内外结合的方式探究京尼平苷酸 (GPA) 对胆汁淤积大鼠胆汁酸肝肠循环作用影响及其基于去乙酰化酶1 (Sirt1) -法尼醇X受体 (FXR) 通路的作用机制探究.将60只SD大鼠随机分为6组, 分别为空白对照组、α-萘异硫氰酸酯 (ANIT) 模型组、阳性对照组 (100 mg·kg-1·d-1UDCA) , 以及100, 50, 25 mg·kg-1·d-1GPA高、中、低剂量组, 每组10只, 给药10d.在第8天药后, 除空白大鼠其余均一次性灌胃65 mg·kg-1ANIT, 末次药后, 测血清谷丙转氨酶 (ALT) 、谷草转氨酶 (AST) 、γ-谷氨酰转移酶 (γ-GGT) 和碱性磷酸酶 (ALP) 活性以及总胆红素 (TB) 和总胆汁酸 (TBA) 的含量; RT-PCR法检测肝组织中胆汁酸肝肠循坏关键基因Sirt1, FXR, 多药耐药相关蛋白2 (MRP2) , 胆盐输出泵 (BSEP) , 钠离子-牛磺胆酸协同转运多肽 (NT-CP) , 回肠中顶端钠-胆汁酸转运体 (ASBT) , 回肠胆汁酸结合蛋白 (IBABP) mRNA转录水平的影响;免疫荧光三染法检测MRP2, BSEP和NTCP在肝脏中表达, ASBT, IBABP在回肠中表达; Western blot法检测肝组织中Sirt1, FXR表达;体外培养原代肝细胞观察GPA对EX 527 (Sirt1抑制剂) 抑制与否, RT-PCR和Western blot法检测细胞中Sirt1和FXR的mRNA和蛋白表达.在体实验表明, GPA能显著降低或改善ANIT诱导的胆汁淤积大鼠血清ALT, AST, γ-GGT, ALP活性和TB, TBA的含量 (P<0. 01) 以及肝组织病理损伤; GPA能显著升高肝组织Sirt1, FXR, MRP2, BSEP, NTCP和回肠中ASBT, IBABP mRNA转录水平和蛋白表达 (P<0. 01) ;体外原代肝细胞实验表明, EX-527能通过抑制原代肝细胞中Sirt1基因和蛋白功能来抑制FXR基因和蛋白表达 (P<0. 01) , GPA可显著提高改善EX-527抑制的原代肝细胞中Sirt1和FXR基因和蛋白的表达 (P<0. 01) .以上结果发现GPA的改善作用呈剂量正相关性.GPA可改善ANIT诱导的胆汁淤积大鼠的胆汁酸肝肠循环发挥保肝利胆作用, 其可能机制是GPA通过激活改善氧化应激损伤关键调控基因Sirt1来激活核受体FXR, 激活的FXR再调控胆汁酸肝肠循环的相关蛋白来实现.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵威	广州中医药大学临床药理研究所	42	240	9.0	13.0
2	李甲	广州中医药大学临床药理研究所	1	4	1.0	1.0