逆转录环介导等温扩增技术检测齿兰环斑病毒

• 作者: 叶秀仙 樊荣辉 罗远华 钟淮钦 黄敏玲
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 齿兰环斑病毒 RT-LAMP 检测
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 824-828
• 页数: 5页
• 分类号: S436
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.07.011

摘要

[目的]齿兰环斑病毒Odontoglossum ringspot virus(ORSV)是侵染兰花的主要病毒,严重影响其观赏价值,建立快速、灵敏的检测方法显得尤为重要.[方法]本研究根据ORSV的外壳蛋白基因序列设计了一组特异性引物,经过一系列条件优化,建立了该病毒的RT-LAMP(Reverse Transcription-Loop-mediated Iisothermal Amplification)检测方法.[结果]结果显示该方法能特异扩增ORSV,与其他4种侵染兰花的病毒(建兰花叶病毒、菜豆黄花叶病毒、黄瓜花叶病毒和小苍兰花叶病毒)不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍.田间检测20份样品中,RT-LAMP和RT-PCR检测结果一致.在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ直接用肉眼观察即可判断样品是否感染ORSV,省去电泳分析的时间,并且增加了在田间的应用价值.[结论]该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点.