摘要:
目的:观察隔药灸对肿瘤坏死因子-α (TNF-α)-肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域(TRADD)-Fas相关的死亡结构域(FADD)途径介导克罗恩病(Crohn's disease,CD)肠上皮细胞凋亡的影响,探讨其作用机制.方法:将48只SD雄性大鼠随机分成正常组、模型组、隔药灸组和西药组,每组12只.采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)制备CD模型,造模成功后隔药灸组采用隔药饼灸“天枢”“气海”穴,每日1次,每次每穴隔药灸2壮,共灸10 d.西药组采用美沙拉嗪灌胃,每日2次,每次2 mL,共灌胃10d.治疗结束后取各组大鼠结肠上皮组织,分离、纯化和培养结肠上皮细胞建立体外肠上皮细胞屏障模型,将100 ng/mL TNF-α分别与各组肠上皮细胞孵育培养24 h,应用荧光黄透过率检测各组肠上皮细胞屏障通透性,Western blot法检测各组肠上皮细胞凋亡途径相关蛋白肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)、TRADD、受体作用蛋白1(RIP1)、FADD、锌指蛋白A20(A20)表达以及流式细胞术观察各组肠上皮细胞凋亡情况.结果:与正常组比较,模型组的荧光黄透过率显著升高(P<0.001),结肠上皮细胞TNFR1、TRADD、RIP1表达量明显升高(P<0.01),A20表达量明显降低(P<0.01),细胞凋亡率显著增高(P<0.001).与模型组比较,隔药灸组和西药组的荧光黄透过率显著降低(P<0.001),结肠上皮细胞TRADD、RIP1、FADD表达量明显降低(P<0.01),A20表达量明显升高(P<0.01),结肠上皮细胞凋亡率显著降低(P<0.001).结论:隔药灸可能是通过调控TNF-α介导CD肠上皮细胞凋亡途径的异常,达到保护或修复CD肠上皮屏障损伤之效应.