体外研究脊髓灰质炎病毒Ⅰ型疫苗株结构蛋白对人呼吸道上皮细胞内天然免疫反应系统的作用及其免疫学意义

• 作者: 冯敏 吴化叶 张莹 李琦涵 柳蕾 牟唐维 王丽春 王建斌 程继帅
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 脊髓灰质炎 脊髓灰质炎病毒(PV) 结构蛋白 信号通路 NF-κB
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 人类病毒研究论著
• 页码范围: 225-232
• 页数: 8页
• 分类号: R373.2|R511
• 语种: 中文
• DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003515

摘要

尽管针对脊髓灰质炎病毒已经有长达数百年的研究并成功研制出了预防性疫苗,但是对于该病毒如何启动机体天然免疫反应,进而激活获得性免疫反应这一过程的具体分子机理仍有诸多空白.本研究通过体外分析脊髓灰质炎病毒Sabin减毒株Ⅰ型的结构蛋白对人呼吸道上皮细胞内天然免疫反应信号分子的影响,了解脊髓灰质炎病毒在上皮细胞中启动免疫信号的具体分子机制.采用PCR方法扩增脊髓灰质炎病毒四种结构蛋白VP1、VP2、VP3和VP4,经酶切纯化后与pcDNA3.1+真核表达载体连接,分别构建含目的基因的四种重组质粒.将重组质粒分别转染至人呼吸道上皮细胞16HBE中,48h后收集培养上清、细胞.提取细胞的总RNA,利用Q-PCR法分别检测四种结构蛋白表达所诱导的天然免疫信号分子的mRNA表达量.同时,上清、细胞裂解物分别与人T细胞共培养,检测其对T细胞增殖的影响.体外在16HBE细胞中分别表达SabinⅠ病毒VP1～VP4四种结构蛋白均可刺激如LTα3、NIK等NF-κB天然免疫信号通路相关分子的表达,并且表达这四种蛋白的细胞裂解物与T细胞共培养后均表现出刺激T细胞非特异性增殖的效应.但是,仅有VP1、VP2表达所诱导分泌相关因子的培养上清才表现出间接刺激T细胞增殖的能力.Sabin Ⅰ毒株的四种结构蛋白可激活NF-κB信号通路,促进T细胞的非特异性增殖,从而激活适应性免疫应答.