杧果露水斑病病原菌枝状枝孢霉的巢氏PCR检测方法的建立

• 作者: 刘晓妹 张贺 朱朝华 杨永利 杨石有 蒲金基
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: 杧果 露水斑病菌 常规PCR 巢式PCR 分子检测
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 111-118
• 页数: 8页
• 分类号: S667.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20180170

摘要

[目的]杧果露水斑病是当前生产上影响杧果产业的重要病害之一,因潜伏期长常在发病初期不易被察觉而错过防治适期,建立其主要致病菌Cladosporium cladosporioides的快速准确检测方法,对于该病的早期诊断和及时防控尤为重要.[方法]将该病菌的ITS序列与NCBI中的数据大量比对后,在差异位点大的区域设计了8对引物,通过筛选获得两对特异性良好的引物及其扩增条件.[结果]两对特异性引物分别是ML-SF9/ML-SR5和ML-SF 10/ML-SR10,扩增条件:94℃4 min;94℃45 s,65℃45 s,72℃1 min,36周;72℃10 min,特异条带大小分别为408bp和424 bp.为了提高检测的灵敏度,又与真菌通用引物ITSl/ITS4结合后,建立了杧果露水斑病病原菌的两套巢式PCR快速检测体系,可检测病菌DNA的含量最低为3.55× 10-9 ng· μL-1,比常规PCR灵敏度提高了1万倍,且能实现对潜伏期果实的特异性检测.[结论]此技术操作简单、特异性强、灵敏度高,为杧果露水斑病的早期诊断提供了新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张贺		51	215	8.0	12.0
2	蒲金基		91	827	16.0	25.0
3	刘晓妹		6	88	1.0	6.0
4	朱朝华		3	19	2.0	3.0
5	杨永利		1	0	0.0	0.0
6	杨石有		4	0	0.0	0.0