鲫脑组织细胞系酵母双杂交cDNA文库的构建及初步应用

• 作者: 刘文枝 史玉恒 周勇 曾令兵 江南 范玉顶 许晨 赵建青
• 来源期刊: 淡水渔业
• 学科: 农学
• 关键词: 酵母双杂交 鲫脑组织细胞cDNA文库 鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25编码蛋白 蛋白质的互作
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 页码范围: 27-32
• 页数: 6页
• 分类号: S917.4
• 字数: 5983字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6907.2019.01.005

摘要

为深入研究鲤疱疹病毒Ⅱ型CyHV-2与宿主细胞相互作用机制,以鲫脑组织细胞系(Gibel carp brain,GiCB)总RNA为模板,反转录合成cDNA,扩增获得双链cDNA,与载体pGADT7-Rec共转化酵母菌Y187,构建了GiCB细胞酵母双杂交cDNA文库.以CyHV-2 ORF25编码蛋白为诱饵,与GiCB细胞酵母双杂交cDNA文库杂交,筛选与其互作的GiCB细胞受体.结果显示:GiCB细胞酵母双杂交cDNA文库转化效率为1.03×106 CFU/μg,滴度为1.24×106 CFU/mL,PCR扩增结果表明文库中插入片段的大小在1.5 kb左右.将表达CyHV-2 ORF25编码蛋白的诱饵菌与GiCB细胞酵母双杂交cDNA文库杂交后,筛选得到与ORF25编码蛋白相互作用蛋白的阳性克隆,为进一步研究CyHV-2的感染机制奠定了前期基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范玉顶	中国水产科学研究院长江水产研究所	30	231	10.0	14.0
2	许晨	中国水产科学研究院长江水产研究所	2	0	0.0	0.0
3	周勇	中国水产科学研究院长江水产研究所	36	264	9.0	15.0
4	史玉恒	中国水产科学研究院长江水产研究所	2	0	0.0	0.0
5	刘文枝	中国水产科学研究院长江水产研究所	15	35	3.0	5.0
6	江南	中国水产科学研究院长江水产研究所	12	64	4.0	8.0
7	赵建青	中国水产科学研究院长江水产研究所	4	1	1.0	1.0