参与唇腭部发育的重要蛋白复合体ESCRTⅢ的单分子检测体系的构建

• 作者: 孙珊 李琳 李瑶 杨梦铱 陈春来 隋森芳
• 来源期刊: 中华口腔正畸学杂志
• 关键词: 唇腭裂 Snf7 ESCRTⅢ 单分子检测 Vps4
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 152-156
• 页数: 5页
• 字数: 4837字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-5760.2019.03.007

摘要

目的 构建参与唇腭部发育的重要蛋白ESCRTⅢ的单分子检测体系.方法 分析ESCRTⅢ蛋白的结构,选取不影响结构稳定和纤丝形成的氨基酸进行突变,体外提取突变蛋白检测蛋白的稳定性,吸收光谱检测突变蛋白荧光标记的效率,负染电镜观察突变蛋白形成纤丝的能力,负染电镜观察和离心沉淀分析突变体蛋白形成的纤丝被Vps4解聚的能力.结果 选取了ESCRTⅢ蛋白Snf7上的5个位点,K57,G58,N59,G120和D122,分别突变为半胱氨酸,其中K57C突变体蛋白不稳定聚沉,G58C突变体蛋白荧光标记效率低,N59C和G120C突变体蛋白影响纤丝形成,只有D122C突变体蛋白稳定,标记效率高,且标记后的蛋白能正常形成纤丝并被Vps4蛋白解聚.结论 筛选出了Snf7 D122C突变体适用于利用单分子技术检测ESCRTⅢ纤丝的解聚动态过程,从而为进一步在细胞水平和体内研究ESCRT系统对腭部发育的作用提供支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李瑶	生物膜国家重点实验室结构生物学高精尖创新中心清华大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
2	杨梦铱	结构生物学高精尖创新中心清华大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
3	李琳	生物膜国家重点实验室结构生物学高精尖创新中心清华大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
4	陈春来	结构生物学高精尖创新中心清华大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
5	隋森芳	生物膜国家重点实验室结构生物学高精尖创新中心清华大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0