pCol(24-38)诱导抗肾小球基底膜肾病大鼠模型的建立

• 作者: 孙脊峰 张涵 杨峰 杨洁 王亭亭 胡杰 谭小猛
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗肾小球基底膜疾病 肾小球肾炎 血尿素氮 pCo1(24-38)
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 238-242
• 页数: 5页
• 分类号: R692.3+1
• 字数: 4168字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2019.03.09

摘要

目的 以含大鼠Ⅳ型胶原α3链的非胶原区[α3(Ⅳ)NC1]的多肽pCol(24-38)作为抗原建立抗肾小球基底膜(GBM)病大鼠模型,研究抗GBM病的发病机制.方法 选择雄性WKY大鼠20只(8～10周龄),体重120～150g,随机分为对照组和抗GBM病模型组,每组10只.抗GBM病模型组使用多肽pCol(24-38)作为抗原,对照组使用多肽pCol(38-52)作为抗原,两组均用完全弗氏佐剂乳化后,于大鼠背部皮下三点注射免疫.免疫后每周定时收集24h尿,测尿蛋白含量,所有动物在免疫后49d处死,取血清,采用肌氨酸氧化酶法检测血清肌酐,脲酶法检测尿素氮浓度,并用间接ELISA法检测血清抗pCol(24-38)抗体相对滴度.取肾脏组织,一部分石蜡切片后行PAS染色及免疫组化染色,另一部分经OCT包埋冷冻切片后用直接免疫荧光法检测IgG在肾小球的沉积情况.结果 与对照组比较,抗GBM病模型组的24h尿蛋白含量自第4周开始明显升高[(52.27±10.50)mg/24h vs.(4.87±0.64)mg/24h,P＜0.001],之后逐渐上升,至第7周,抗GBM病模型组的24h尿蛋白含量仍明显高于对照组[(255.80±9.79)mg/24h vs.(5.78±0.39)mg/24h,P＜0.001];抗GBM病模型组血清肌酐水平[(145.3±22.60)μmol/L vs.(36.81±2.21)μmol/L,P＜0.001]、尿素氮水平[(26.59±5.01)mmol/L蟾(6.92±0.27)mmol/L,P＜0.001]均明显升高;抗GBM病模型组的循环抗pCol(24-38)IgG抗体水平明显高于对照组[(1.59±:0.18)vs.(0.09±0.01),P＜0.05].抗GBM病模型组PAS染色可见肾小球硬化,弥漫性新月体形成,免疫组化染色可见肾小球有明显的巨噬细胞浸润,荧光染色可见IgG在GBM呈明显线性沉积;而对照组PAS染色未见异常肾小球,免疫组化染色未见巨噬细胞浸润,荧光染色在GBM上未发现IgG沉积.结论 使用多肽pCol(24-38)作为抗原免疫WKY大鼠能成功构建抗GBM病动物模型.该抗原制备方法简单,对于设计新的抗GBM病的治疗策略有重要价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭小猛	西安空军军医大学唐都医院肾脏内科	2	0	0.0	0.0
2	王亭亭	西安空军军医大学唐都医院肾脏内科	2	0	0.0	0.0
3	胡杰	西安空军军医大学唐都医院肾脏内科	4	2	1.0	1.0
4	杨峰	西安空军军医大学唐都医院肾脏内科	2	0	0.0	0.0
5	张涵	西安空军军医大学唐都医院肾脏内科	2	0	0.0	0.0
6	孙脊峰	西安空军军医大学唐都医院肾脏内科	4	2	1.0	1.0
7	杨洁	西安空军军医大学唐都医院肾脏内科	4	2	1.0	1.0