白念珠菌环介导等温扩增法的建立及其应用价值

• 作者: 吴文娟 孔继烈 方雪恩 王丽娟 肖晶晶
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 环介导等温扩增 核酸检测 白念珠菌 外阴阴道念珠菌病
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 5-10
• 页数: 6页
• 分类号: R446.5
• 字数: 5036字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2019.01.02

摘要

目的 建立一种简单快速检测白念珠菌的环介导等温扩增技术(LAMP),并评价其临床价值.方法 采用Primer Explorer5.0软件,针对白念珠菌RPSO基因设计4条引物,对LAMP反应体系和反应条件进行优化,评价检测特异性和检测限;收集123例外阴阴道念珠菌病(VVC)组和42例正常对照组的女性阴道拭子,平行进行真菌培养、LAMP检测、PCR检测、1.79 mol/L KOH镜检,真菌培养作为VVC诊断参考方法;组间检测方法阳性率的比较采用Pearson x2检验,LAMP、PCR、镜检与培养法的一致性采用Kappa检验,P＜0.05为差异有统计学意义;应用ROC曲线分析法评价LAMP、PCR在VVC诊断中的价值.结果 LAMP技术的最适反应温度为61℃,且特异性高,与其他常见菌株无交叉反应,检测限为103 copies/μL;VVC组和正常对照组的LAMP、PCR、镜检阳性率差异有统计学意义(LAMP,x2=68.576;PCR,x2=64.918;镜检,x2=50.076,P＜0.01).LAMP和PCR与培养法有较好的一致性(к=0.744,0.720),镜检与培养法一致性较差(к=0.533);LAMP对VVC的诊断敏感性为87.62％,特异性为88.33％,阳性预测值为92.93％,阴性预测值为80.30％.LAMP、PCR诊断VVC的ROC曲线下面积分别为0.873、0.888,两者的诊断效能差异无统计学意义(Z=0.849,P=0.395 6),但LAMP检测时间短于1h.结论 建立的检测白念珠菌的LAMP技术快速可靠、敏感性好、特异性高,综合筛查性能优于实验室常规方法,可用于白念珠菌感染的辅助诊断和疗效监控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔继烈	复旦大学化学系	26	363	10.0	19.0
2	吴文娟	同济大学附属东方医院南院医学检验科	44	167	8.0	10.0
3	肖晶晶	同济大学附属东方医院南院医学检验科	1	2	1.0	1.0
4	王丽娟		1	2	1.0	1.0
5	方雪恩	复旦大学化学系	1	2	1.0	1.0