目的:通过与常规制备脾细胞悬液方法比较,探讨一种具有机械损伤度小,活细胞比例高,收集细胞较多的脾细胞悬液制备方法.方法:常规取小鼠脾脏,放入小平皿内,用带有弯曲针头的注射器在含有1~2 mL PBS的小平皿中刮出脾细胞;再用5mL和2mL注射器依次吹打混匀,洗涤脾细胞,计数.常规脾细胞悬液制备方法为机械研磨分散法.结果:采用改良的脾细胞悬液法使活细胞比例在98%以上,脾细胞收集较多,体重25g左右的昆明系小鼠脾细胞收集量能达到1.6×108/mL,脾细胞相对较完整且能用于进一步的研究.结论:改良的脾细胞悬液制备方法较常规的方法操作简便,且具有机械损伤度小,脾细胞相对较完整的优点,值得推广和应用.