颅脑手术患者废弃脑组织中神经干细胞的培养与鉴定

• 作者: 孙移坤 崔绍杰 王佳 王涛 赵全军 顾建文
• 来源期刊: 解剖学杂志(社会科学版)
• 关键词: 颅脑手术 废弃脑组织 自体神经干细胞 细胞培养 立体定向移植
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 142-147
• 页数: 6页
• 字数: 5997字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1633.2019.02.008

摘要

目的:研究颅脑手术患者废弃脑组织中神经干细胞的培养与鉴定,为立体定向自体神经干细胞移植治疗脑出血、脑梗塞及颅脑损伤后遗症提供临床前基础.方法:通过改进原代培养方法,从颅脑手术患者废弃脑组织中培养和鉴定神经干细胞(NSCs).收集颅脑手术患者不同脑区废弃脑组织各约500mg以上,按改良方法进行原代培养并传代,通过免疫荧光检测NSCs标志物巢蛋白(Nestin)的表达,传代培养5代时开始进行诱导分化.结果:培养约3～10d后,多数患者废弃脑组织中均可见干细胞球生长,经Nestin免疫荧光检测均呈阳性表达.选取第6代诱导分化后的贴壁细胞分别经β-Tubulin(神经元标志物)、Sox10(少突胶质细胞标志物)与GFAP(星形胶质细胞标志物)免疫荧光检测,可见少量神经元、少突胶质细胞及星形胶质细胞阳性表达.取第3代与第6代细胞行免疫印迹鉴定,第3代细胞仅见Nestin与少量β-Tubulin表达,第6代细胞可见不同程度的Nestin、β-Tubulin、Sox10及GFAP等表达.结论:本研究成功从颅脑手术患者不同脑区废弃脑组织中分离培养获得成人NSCs,并可向神经元及神经胶质细胞分化,使立体定向自体神经干细胞移植促进神经功能修复从实验室到临床应用成为可能.