摘要:
本研究探讨人特异性CHRFAM7A基因抑制小鼠肾缺血再灌注损伤早期炎症作用及其机制.12只野生型(wild type,WT) C57BL/6成年雄性小鼠随机分为2组:野生型假手术组(WT Sham)和野生型肾缺血再灌注损伤(WT RIRI)组.12只性别、年龄匹配的CHRFAM7A转基因(transgenicmice,GT)小鼠也随机分组为:转基因型假手术组(GT Sham)和转基因型肾缺血再灌注损伤(GTRIRI)组,每组各6只.除WT和GT假手术组仅行剖腹手术外,所有小鼠均夹闭双侧肾蒂40 min,再灌注24 h后,留取各组小鼠血清及肾组织标本.生化分析仪检测血清中的尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)水平;ELISA法检测白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和胱天蛋白酶7水平;免疫组织化学染色法检测高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达水平;苏木-伊红(HE)染色和原位末端标记法(TUNEL)染色观察肾组织病理损伤;流式检测HK-2细胞凋亡率.结果显示,与WT Sham组对比,WT RIRI组血清中,BUN、Scr、IL-8和TNF-α含量增加(P<0.0001);肾组织中,胱天蛋白酶7水平增高(P<0.001),HMGB1平均光密度值增加(P<0.0001),肾组织细胞凋亡指数(AI%)增高(P<0.0001).与GT Sham组对比,GT RIRI组血清BUN、Scr、IL-8和TNF-α含量增加(P<0.05,P<0.0001,P<0.01,P<0.01);肾组织中,胱天蛋白酶7水平明显增高(P<0.01),HMGB1平均光密度值增加(P<0.0001),肾组织细胞AI%增高(P=0.0005).与WT RIRI组对比,GT RIRI组血清中的BUN、Scr水平降低(P<0.0001),IL-8、TNF-α、HMGB1和胱天蛋白酶7的水平明显下降(P<0.01,P<0.0001,P<0.0001,P<0.01),肾组织细胞凋亡指数(AI%)下降(P=0.0003).与pLVX空载质粒+氯化钴组相比,pLVX-CHRFAM7A+氯化钴组的凋亡率(19.31%±1.45vs 34.92%±4.21,P<0.001)明显下降.上述结果表明,人特异性CHRFAM7A基因在小鼠肾缺血再灌注损伤中,通过抑制早期的炎症反应,对肾组织发挥保护作用.