重组人免疫球蛋白D-Fc片段蛋白的构建

• 作者: 吴育晶 张静 胡晓曦 陈文生 魏伟 黄琼
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 免疫球蛋白D IgDR 自身免疫性疾病 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 514-519
• 页数: 6页
• 分类号: R967
• 字数: 4340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.04.003

摘要

目的 构建重组人免疫球蛋白D-Fc(IgD-Fc)片段蛋白,检测IgD受体(IgDR)在健康人CD4+T细胞和T淋巴瘤细胞株Jurkat、MOLT-4上的表达情况,检测IgD-Fc与IgD竞争结合CD4+T细胞表面IgDR的能力.方法 采用PCR法得到人IgD-Fc目的基因,经原核蛋白表达和层析纯化,制备出重组人IgD-Fc片段蛋白.流式细胞术检测IgDR在健康人CD4+T细胞和T淋巴瘤细胞株Jurkat、MOLT-4上的表达情况,以及IgD、重组人IgD-Fc片段蛋白与CD4+T细胞表面IgDR的竞争结合情况.结果 成功构建含IgD-Fc基因片段的原核表达载体pET28a(+)/IgD-Fc,得到重组人IgD-Fc片段蛋白.CD4+T细胞及T淋巴瘤细胞株表面IgDR与IgD亲和力相近,重组人IgD-Fc片段蛋白可与IgD竞争性结合IgDR.结论 重组人IgD-Fc片段蛋白工艺成熟稳定,可与IgD竞争性结合IgDR,可能成为针对IgD水平升高的自身免疫性疾病的新型治疗药物.