摘要:
[目的]探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)对内脏脂肪组织前脂肪细胞增殖和分化的调控作用.[方法]分别采用CFTR基因敲除小鼠(CFTR KO)4、8周龄及同周龄野生型对照鼠,分离内脏脂肪组织前脂肪细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测增殖分化转录因子表达变化.采用地塞米松-异丁基甲基黄嘌呤-胰岛素(DMI)诱导3T3-L1细胞建立前脂肪细胞分化模型,采用免疫印迹(Western blot)技术检测CFTR及分化因子蛋白表达变化;并进一步转染CFTR沉默及过表达病毒,采用免疫印迹,实时荧光定量PCR技术,MTT检测和油红O染色,观察基因干预CFTR后对DMI诱导3T3-L1细胞增殖及分化的影响.采用高脂饮食肥胖小鼠模型,荧光定量PCR技术检测内脏前脂肪细胞增殖分化转录因子和CFTR基因水平表达.[结果]CFTR基因敲除鼠内脏前脂肪细胞指标Pref-1,增殖因子CyclinD1,分化转录因子PPARγ,C/EBPα表达明显降低(P<0.05).DMI诱导3T3-L1细胞分化早期,CFTR的表达增加(P<0.05);转染CFTR沉默病毒后,抑制DMI诱导的3T3-L1细胞增殖(C/EBPβ,C/EBPδ,CREB,KLF4)及末端分化指标(SREBP-1,PPARγ,C/EBPα)表达,而转染CFTR过表达病毒后,促进DMI诱导的3T3-L1细胞增殖及末端分化.高脂饮食喂养小鼠2,4周,高脂饮食组内脏前脂肪细胞增殖分化转录因子(PPARγ,C/EBPα,C/EBPβ,C/EBPδ,SREBP-1,FABP4)表达升高,CFTR基因表达升高(P<0.05).[结论]CFTR可能通过调控前脂肪细胞增殖及分化影响脂肪组织功能.