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干扰ORAI1表达对前列腺癌PC-3细胞迁移侵袭及上皮间质转化的影响
干扰ORAI1表达对前列腺癌PC-3细胞迁移侵袭及上皮间质转化的影响
作者:
何晓亮
章民昊
顾鹏
黎美琳
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
前列腺肿瘤
钙释放激活钙通道蛋白1
肿瘤转移
上皮间质转化
摘要:
目的:观察钙释放激活钙通道蛋白1(ORAI1)对前列腺癌PC-3细胞侵袭转移能力的影响并探讨其在上皮间质转化(EMT)过程中的作用。方法:将携带ORAI1基因的小干扰RNA(shRNA)慢病毒载体LV-ORAI1-RNAi转染人前列腺癌PC-3细胞(KD组),同时设对照组(NC组),并添加转化生长因子β1(TGF-β1)。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot验证抑制ORAI1表达的有效性。采用Celigo划痕实验及Transwell迁移、侵袭实验检测抑制ORAI1对细胞运动及迁移、侵袭能力的影响。采用Western blot检测EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波动蛋白(Vimentin)及smad3、p-smad3在各组细胞中含量的差异。结果:与对照组相比,转染LV-ORAI1-RNAi后,细胞内ORAI1的mRNA及蛋白水平均降低。Celigo划痕实验显示,与NC组(14.38%±0.77%)比较,KD组(10.24%±1.17%)迁移率降低( P<0.05);与NC+TGF-β1组(26.21%±2.23%)比较,KD+TGF-β1组(12.44%±1.29%)迁移率降低( P<0.05)。Transwell迁移实验显示,与NC组(298±14.2)比较,KD组(229±8.4)迁移细胞数目降低( P<0.05);与NC+TGF-β1组(338±12.9)比较,KD+TGF-β1组(216±12.2)迁移细胞数目降低( P<0.05)。Transwell侵袭实验显示,与NC组(79±4.6)比较,KD组(46±3.4)侵袭细胞数目降低( P<0.05);与NC+TGF-β1组(123±5.1)比较,KD+TGF-β1组(66±5.5)侵袭细胞数目降低( P<0.05)。Western blot结果显示,与NC组比较,NC+TGF-β1组E-cadherin表达下降,N-cadherin和Vimentin表达升高;与NC+TGF-β1组比较,KD+TGF-β1组E-cadherin表达水平升高,N-cadherin、Vimentin和p-smad3表达下降。 结论:降低ORAI1表达后,PC-3细胞转移能力下降,可能通过TGF-β/smad3信号通路逆转EMT有关。
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篇名
干扰ORAI1表达对前列腺癌PC-3细胞迁移侵袭及上皮间质转化的影响
来源期刊
中华转移性肿瘤杂志
学科
关键词
前列腺肿瘤
钙释放激活钙通道蛋白1
肿瘤转移
上皮间质转化
年,卷(期)
2019,(4)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
12-17
页数
6页
分类号
字数
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.issn.2096-5400.2019.04.003
五维指标
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2019(0)
参考文献(0)
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研究主题发展历程
节点文献
前列腺肿瘤
钙释放激活钙通道蛋白1
肿瘤转移
上皮间质转化
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华转移性肿瘤杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
季刊
ISSN:
2096-5400
CN:
10-1548/R
开本:
16开
出版地:
南京市江宁区湖山路169号南京医科大学附属江宁医院
邮发代号:
创刊时间:
2018
语种:
chi
出版文献量(篇)
188
总下载数(次)
0
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