“红颜”草莓原生质体制备及瞬时转化体系的建立

• 作者: 曾弓箭 杜小云 沈祥陵 王翠华 王震
• 来源期刊: 生物资源
• 学科: 生物学
• 关键词: “红颜”草莓 悬浮细胞系 原生质体制备 瞬时转化体系
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 532-538
• 页数: 7页
• 分类号: Q7
• 字数: 5052字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14188/j.ajsh.2019.06.008

摘要

为探索“红颜”草莓悬浮细胞系原生质体提取的最优条件,并建立“红颜”草莓原生质体瞬时转化体系,以“红颜”草莓悬浮细胞为材料,对酶液组成、酶解温度、酶解方式进行研究.用PEG介导的瞬时转化法将标记基因GFP转化到“红颜”草莓原生质体中.结果 显示:以“红颜”草莓悬浮细胞系作为分离材料,酶液组合为CPW中含有0.5％PVP+0.1％MES+1％纤维素酶+0.5％离析酶+0.01％半纤维素酶+-0.9 mol/L甘露醇,在低速(50 r/min)恒温(31℃)震摇下进行酶解反应,酶解10h时,达到“红颜”草莓原生质体最佳分离效果,每克鲜重产量可得原生质体6×108个,活力值可达93.0％.PEG介导法成功将含有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的植物表达载体转化“红颜”草莓悬浮细胞原生质体,转化效率达44％.通过实验筛选得到“红颜”草莓悬浮细胞原生质体的最佳制备条件,建立“红颜”草莓悬浮细胞原生质体的瞬时转化体系,为进一步开展“红颜”草莓功能基因及合成生物学研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王震	三峡大学三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室	3	3	1.0	1.0
2	杜小云	三峡大学三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室	3	0	0.0	0.0
3	沈祥陵	三峡大学三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室	3	0	0.0	0.0
4	王翠华	三峡大学三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室	5	5	2.0	2.0
5	曾弓箭	三峡大学三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室	1	0	0.0	0.0