拟南芥AtGrp7RRM结构域的纯化及其结构与结合的初步分析(英文)

• 作者: 乔晓亚 刘惠丽 刘颖 王际辉 艾选军 迟秀娟 陈雷
• 来源期刊: 波谱学杂志
• 学科: 物理学
• 关键词: 变性-复性 快速稀释 核磁共振(NMR) AtGrp7RNA识别基序(RRM)结构域 结合分析
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-14
• 页数: 14页
• 分类号: O482.53
• 语种: 中文
• DOI: 10.11938/cjmr20182637

摘要

富含甘氨酸的RNA结合蛋白AtGrp7是拟南芥(Arabidopsis thaliana)调节生物钟负反馈回路的组分.在使用常规方法纯化AtGrp7 RRM结构域的初始试验中,观察到烟草蚀纹病毒(TEV)酶切后AtGrp7 RNA识别基序(RRM)结构域的紫外吸收峰为蛋白和杂质的混合信号峰.为解决常规纯化中的杂质问题,对AtGrp71-90应用了变性-复性两步纯化方法.AtGrp7 RRM结构域的1H-15N HSQC指纹谱和CS-Rosetta模型结构表明快速稀释重折叠后其结构完全恢复.等温滴定量热法(ITC)和核磁共振(NMR)滴定实验进一步证实,重折叠后AtGrp71-90 RRM结构域具有正确结合RNA/DNA的功能.