流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞吞噬荧光标记细菌的方法学探讨

• 作者: 何芳 冉丕鑫 李乃健 潘天惠
• 来源期刊: 中国呼吸与危重监护杂志
• 关键词: 流式细胞术 肺泡巨噬细胞 细菌 吞噬功能
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 其他
• 页码范围: 479-483
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7507/1671-6205.201803034

摘要

目的 建立流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞(AM)吞噬AlexaFluor 488 (AF488)荧光染料标记细菌的方法.方法 用不同浓度的AF488标记金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌,流式细胞术检测AF488对上述细菌的标记率和平均荧光强度;AM与不同浓度比例的AF488标记的细菌于37℃共孵育2、4、6和8h,洗涤后加台盼蓝淬灭未被吞噬的细菌荧光,流式细胞术检测AM平均荧光强度、吞噬率和吞噬指数;激光共聚焦荧光显微镜下观察AM吞噬细菌的情况及分布.结果 AF488的浓度大于50 μg/mL时,金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌的标记率均大于92％(P＜0.05),金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌的标记率在荧光染料浓度大于50 μg/mL便已迅速达到上限.随着孵育时间的延长,AM的吞噬率从孵育2h的20.4％升高到8h的76.5％.随着细菌比例的增加,AM的吞噬率从1∶10的7.7％升高到1∶300的85.1％.结论 流式细胞术检测AM吞噬AF488荧光染料标记的细菌是测定AM吞噬活性的有效方法,但染料浓度、孵育时间和细菌比例均会对结果产生影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何芳		5	1	1.0	1.0
2	冉丕鑫		15	81	3.0	9.0
3	李乃健		3	0	0.0	0.0
4	潘天惠		1	0	0.0	0.0