对硫磷纳米抗体筛选及分子识别机制研究

• 作者: HAMMOCK Bruce D 司睿 吕丽珊 孙远明 张玉琪 张瑾如 李家冬 沈玉栋 王弘 王锋
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 纳米抗体 对硫磷 噬菌体展示 分子模拟
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1419-1426,中插7-中插8
• 页数: 9页
• 字数: 6443字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19756/j.issn.0253-3820.181772

摘要

对硫磷是一种广谱的有机磷酸酯类杀虫、杀螨剂,毒性极强,可对环境和人类健康造成严重危害.尽管我国已禁止使用对硫磷,但仍存在违禁使用现象,加强对其监测十分必要.纳米抗体是已知最小的与抗原结合的片段(15 kDa),来源于骆驼科动物体内重链抗体的可变区,具有稳定性强、灵敏度高、易表达、水溶性好等特性.本研究基于噬菌体展示技术构建了抗对硫磷纳米抗体库,其库容为2.41×107 cfu/mL,经抗原-抗体固相亲和筛选及噬菌体酶联免疫法(Phage ELISA)鉴定,获得5种抗对硫磷纳米抗体VHH1、VHH6、VHH13、VHH21和VHH24.以结合能力最强的VHH1为基础,采用同源建模和分子对接技术探讨VHH1与对硫磷分子的识别机制,发现VHH1与对硫磷存在氢键和疏水间分子作用力,关键氨基酸是Ser60、Lys104、Phe105、Gly106和Arg107.本研究为抗体的进化改造和半抗原的设计提供了新思路.