苦参双功能核酸酶1的体外表达及结构性质分析

• 作者: 刘苗苗 吴家文 廖怡 杨青山 赵德蕊
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 苦参 双功能核酸酶1 基因克隆 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3620字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2019.02.017

摘要

植物双功能核酸酶1影响植株生长、发育及衰老,且研究表明其具有抗肿瘤活性.基于苦参转录组数据克隆了苦参(Sophora flavescens Ait.)中双功能核酸酶1基因的开放读码框(SfBFN1),分析其编码蛋白的理化性质和结构特点.采用RT-PCR方法扩增SfBFN1基因片段,纯化后与pET22b(+)载体连接并转化到大肠杆菌感受态细胞BL21,并以不同的诱导条件,筛选其体外表达的最适宜条件.结果获得了SfBFN1的开放读码框片段,长度为984 bp,编码327个氨基酸,SfBFN1蛋白分子质量约为36.2 ku;利用PHYRE2在线软件预测SfBFN1蛋白的部分三级结构,其富含α螺旋与β折叠,5个α螺旋包裹着7个β折叠,构成了蛋白质立体结构的框架.研究为SfBFN1蛋白开发成为抗癌蛋白质药物制剂奠定了实验基础.