Bmo-miR-2788对家蚕丝胶蛋白基因Ser-1的表达调控

• 作者: Rehana Kandhro 朱娟 沈兴家 钱平 陈艳花
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: miRNA BmN细胞 丝胶蛋白基因 BmSer-1 Bmo-miR-2788 基因调控
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 811-820
• 页数: 10页
• 分类号: S881.2|Q74
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2019.06.005

摘要

通过生物信息学分析发现,家蚕丝胶蛋白基因BmSer-1的3'非翻译区(3'-UTR)存在微小RNA Bmo-miR-2788的结合位点.半定量PCR结果显示,Bmo-miR-2788在家蚕5龄第4天幼虫的8个受试组织中均有表达,但在中部丝腺中表达水平最高;而BmSer-1仅在中部丝腺中被检测到.分别构建BmSer-1 3'-UTR和Bmo-miR-2788的表达载体pGL3.0(A 3-luc-BmSer-1-3'-UTR-SV40)和pcDNA3.0(ie1-egfp-pri-Bmo-miR-2788-SV40),共转染BmN细胞,结果表明Bmo-miR-2788上调BmSer-1表达(P＜0.01);当将上述载体与合成的Bmo-miR-2788抑制剂共转染BmN细胞时,BmSer-1表达显著下调(P＜0.05).为验证Bmo-miR-2788在蚕体内对BmSer-1表达的调控作用,将Bmo-miR-2788表达质粒与其阴性对照(pcDNA3.0)分别注射到家蚕5龄第3天幼虫体内,qRT-PCR分析结果显示,与阴性对照相比,注射Bmo-miR-2788后36 h中部丝腺中的BmSer-1表达显著上调(P＜0.01).上述结果表明Bmo-miR-2788正向调控BmSer-1基因的表达.