嗜水气单胞菌气溶素的表达纯化和活性实验

• 作者: 刘永涛 杨秋红 杨移斌 胥宁 艾晓辉 董靖
• 来源期刊: 中国渔业质量与标准
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 气溶素 原核表达 纯化 溶血活性 PCR扩增 分子克隆
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 病害与渔药
• 页码范围: 27-33
• 页数: 7页
• 分类号: S942
• 字数: 5088字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1833.2019.01.004

摘要

气溶素(AerA)是嗜水气单胞菌分泌的重要毒力因子之一.为开展抗气溶素药物的筛选,本实验设计得到高纯度的气溶素重组蛋白并研究其生物学活性.本实验依据嗜水气单胞菌气溶素基因(aerA)序列设计特异性引物,采用PCR扩增、酶切、连接构建aerA-pGEX-6p-1原核表达载体,经测序验证后将其转化至BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导、亲和层析、离子交换层析纯化,然后进行溶血试验测定其生物学活性.结果 表明,当表达温度为16℃,经0.2 mmol/L IPTG诱导表达16 h后可得到可溶性蛋白,纯化后其纯度大于95％,该蛋白对绵羊红细胞的溶血单位为54.17 HU/μg.本实验通过原核表达、纯化得到的可溶性重组气溶素蛋白,具有良好的溶血活性,为进一步探究气溶素功能及其应用铺垫基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘永涛	中国水产科学研究院长江水产研究所	46	284	10.0	15.0
2	胥宁	中国水产科学研究院长江水产研究所	12	21	2.0	4.0
3	杨秋红	中国水产科学研究院长江水产研究所	15	34	3.0	5.0
4	艾晓辉	中国水产科学研究院长江水产研究所	73	663	15.0	22.0
5	杨移斌	中国水产科学研究院长江水产研究所	28	56	4.0	6.0
6	董靖	中国水产科学研究院长江水产研究所	10	12	2.0	3.0