血栓性疾病个体化用药指导基因芯片试剂盒的制备和效果评价

• 作者: 关雪娃 王国强 王放 王紫嫣 章宏 袁语泽 郑敬彤 郭英俏 陈光 马明星
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 血栓性疾病 基因芯片 氯吡格雷 华法林
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1267-1274,前插2-前插3
• 页数: 9页
• 分类号: R540.4
• 字数: 5593字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190613

摘要

目的:探讨血栓性疾病(TD)个体化用药指导基因芯片的制备过程,阐明一种快速、高通量检测氯吡格雷和华法林药物代谢基因的方法.方法:根据氯吡格雷药物代谢基因位点(CYP3 A4、CYP2C19*17、CYP2C19*2和CYP2C19*3)和华法林药物代谢基因位点(CYP4F2*3、GGCX、VKORC1-2、VKORC1-1、CYP2C9*2和CYP2C9*3)设计相应的探针和引物,制备TD个体化用药指导的基因芯片检测试剂盒.经过DNA提取、PCR扩增、杂交、洗脱和扫描等步骤对基因芯片的灵敏性、重复性和稳定性进行评价.收集3个地区的150例TD受试者样本并进行药物代谢基因检测,以受试者在临床中接受的用药指导及6个月后患者的疾病恢复情况为依据,评价基因芯片试剂盒的有效率.结果:基因芯片检测2种药物的代谢基因均出现良好的杂交信号;芯片检测PCR扩增产物的最低检测浓度为103 copies·mL-1;对不同批次的3张芯片及同一批次的10张芯片进行平行测定,符合率为100％;芯片具有稳定性,有效期长达6个月;来源于3个地区的150例TD样本验证基因芯片检测试剂盒的有效率在90％以上.结论:成功制备了高通量检测氯吡格雷和华法林药物代谢基因的TD个体化用药指导基因芯片试剂盒,该方法灵敏度高,重复性好,稳定性强,制备效果优良.