靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体T细胞的构建及其对肿瘤细胞的杀伤

• 作者: 凡鹏程 刘根桃 吴国祥 张大挺 朱学军 李彦涛 杨振莉 汪敏亮 田芳 郝瑞栋
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: B细胞成熟抗原 嵌合抗原受体 多发性骨髓瘤 γ干扰素 杀伤功能
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 152-158
• 页数: 7页
• 分类号: R730.5|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2019.02.003

摘要

目的:探索通过嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T细胞靶向B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)以治疗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的方法.方法:构建基于鼠源BCMA scFv的CAR-BCMA分子,包装为慢病毒载体并感染健康人T细胞构建CAR-BCMA-T细胞;构建BCMA阳性细胞系A549-BCMA、A549-BCMAOFP和K562-BCMA作为靶细胞.将CAR-BCMA-T细胞与构建的靶细胞和人骨髓瘤细胞U266共孵育,CCK-8法和流式细胞术检测其对BC-MA阳性肿瘤细胞的杀伤能力.构建MM患者来源CAR-BCMA-T细胞并检测其杀伤靶细胞A549-BCMA的能力,并采用ELISA和流式细胞术检测CAR-BCMA-T细胞IFN-γ的释放水平.结果:健康人来源的CAR-BCMA-T经过11d培养扩增300倍,阳性率达到43％;成功构建BCMA阳性靶细胞.在5:1效靶比下,CAR-BCMA-T对A549-BCMA、K562-BCMA和U266细胞的杀伤率分别在80％、60％和80％左右,显著高于对BCMA阴性细胞的杀伤率,且杀伤力与靶细胞的BCMA表达强度相关.在效靶比20:1时,MM患者来源CAR-BCMA-T细胞对靶细胞A549-BCMA的杀伤率达到95％以上,并且大量分泌IFN-γ.结论:本研究成功构建了健康人及MM患者来源的靶向BCMA的CAR-T细胞,其能够有效特异杀伤BCMA阳性的肿瘤细胞.