斑节对虾TRIAP1基因的克隆、表达分析以及调控其表达的 miRNAs的筛选

• 作者: 刘恩瑞 王鹏飞 范嗣刚 赵超 邱丽华 闫路路
• 来源期刊: 南方水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 斑节对虾 TRIAP1 Pm-miR-145-3p Pm-miR-454-3p 哈氏弧菌
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 88-98
• 页数: 11页
• 分类号: S917.4
• 字数: 6931字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12131/20180285

摘要

凋亡抑制因子1(tumor protein p53 regulated inhibitor of apoptosis 1,TRIAP1)可以通过抑制细胞凋亡参与生物体内应激反应.为探究TRIAP1基因及调控其表达的miRNAs在斑节对虾(Penaeus monodon)应对哈氏弧菌(Vibrio harveyi)刺激时的表达调控情况,该研究通过RACE技术获得了斑节对虾TRIAP1基因(PmTRIAP1)cDNA全长序列,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术,对PmTRIAP1在斑节对虾不同组织中的表达分布模式,以及哈氏弧菌刺激下PmTRIAP1与相关miRNAs的表达关联情况进行了探究.结果显示,PmTRIAP1 cDNA全长2522 bp,包括11 bp的5'非编码区(UTR)、2289 bp的3'UTR和222 bp的开放阅读框(ORF),共编码73个氨基酸.PmTRIAP1基因在各组织中均有表达,其中在血细胞中表达量最高;哈氏弧菌刺激下,PmTRI-AP1表达量显著降低,而Pm-miR-145-3p和Pm-miR-454-3p表达量显著升高,表明PmTRIAP1和Pm-miR-145-3p、Pm-miR-454-3p的表达量呈负相关关系;双荧光素酶报告实验结果显示,Pm-miR-145-3p和Pm-miR-454-3p可通过结合PmTRIAP13'UTR降低荧光素酶活性,表明Pm-miR-145-3p和Pm-miR-454-3p均可靶向调控PmTRIAP1的表达.