CREBBP-m6A报告系统的建立和验证

• 作者: 曾文先 郭佳银 黄瑫
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: N6-甲基腺嘌呤(m6A) RNA修饰 CREBBP-m6A
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 10-16
• 页数: 7页
• 分类号: S811.5
• 字数: 3540字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1182.2019.03.003

摘要

N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是真核生物信使RNA(Messenger RNA,mRNA)上最丰富的一种化学修饰,受到甲基转移酶和去甲基化酶的调控而呈现动态变化的状态.m6A识别蛋白可识别并特异性结合到m6A修饰位点,调控mRNA的剪接、降解和翻译进程,从而调节基因的表达.选择包含3个m6A修饰位点的CREBBP基因3'UTR序列连接到红色荧光mCherry序列的下游,将得到的mCherry-CREBBP 3'UTR片段插入到pCD513B-CMV载体的EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点之间,得到CREBPP-m6A报告质粒pCMV-mCherry-CREBBP,并在GC-1细胞和293T细胞中验证了CREBBP-m6A报告质粒的功能,发现红色荧光强度和m6A水平呈负相关.研究结果提示,可将pCMV-mCherry-CREBBP质粒转入靶细胞,通过红色荧光的强度来检测m6A修饰的变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾文先	西北农林科技大学动物科技学院	17	31	4.0	5.0
2	郭佳银	西北农林科技大学动物科技学院	1	1	1.0	1.0
3	黄瑫	西北农林科技大学动物科技学院	1	1	1.0	1.0