摘要:
目的 探讨线粒体乙醛脱氢酶(ALDH2)影响心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌线粒体功能和室性心动过速的机制. 方法 选取60只健康雄性SD大鼠,随机分为3组:假手术(sham)组、MIRI model组和ALDH2组,每组20只.ALDH2组在建模之前,大鼠给予2.5%乙醇(乙醛脱氢酶2激动剂)日常饮用,1周后乙醇调整至5%,持续8周.建立大鼠心肌缺血再灌注(ML/R)模型.采用标准肢体Ⅱ导联心电图连续监测大鼠心律失常变化;采用ELISA法测定大鼠心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量;采用流式细胞仪测定大鼠心肌线粒体膜电位的变化;采用实时定量PCR (q-PCR)法检测大鼠心肌组织中Bax的mRNA表达;采用Western blot检测大鼠心肌组织中ALDH2和Caspase-3的蛋白表达. 结果 心律失常测定显示,与sham组相比,model组大鼠室性心动过速的发生率升高(P<0.01),其持续时间较长(P<0.01);而AL-DH2组大鼠室性心动过速的发生率低于model组(P<0.01),其持续时间较短(P<0.01).ELISA测定显示,与sham组相比,model组大鼠心肌组织中SOD的含量降低(P<0.01),MDA的含量升高(P<0.01);而与model组相比,ALDH2组大鼠心肌组织中SOD的含量升高(P<0.01),MDA的含量降低(P<0.01).采用阳离子绿色荧光染料罗丹明123对线粒体的膜电位进行检测,与sham组相比,model组大鼠心肌线粒体膜电位降低(P<0.01),而ALDH2组大鼠心肌线粒体膜电位较model组升高(P<0.01).q-PCR测定显示,与sham组相比,model组大鼠心肌组织中Bax的mRNA表达上调(P<0.01);而ALDH2组大鼠心肌组织中Bax的mRNA表达较model组降低(P<0.01).Western blot测定显示,与sham组相比,model组大鼠心肌组织中ALDH2的蛋白表达下调(P<0.01),Caspase-3蛋白表达上调(P<0.01);而ALDH2组大鼠心肌组织中ALDH2的蛋白表达相对于model组升高(P<0.01),Caspase-3蛋白表达低于model组(P<0.01). 结论 增强ALDH2在MIRI大鼠心肌组织中的表达对MIRI有保护作用,其机制可能与抵抗室性心动过速、缓解氧化应激反应、提高心肌组织中线粒体膜电位及抑制细胞凋亡的发生有关.