麻痹性贝类毒素GTX1&4和GTX2&3标准样品的 制备技术

• 作者: 吴海燕 姚琳 彭吉星 翟毓秀 谭志军 郑关超 郭萌萌
• 来源期刊: 中国渔业质量与标准
• 学科: 农学
• 关键词: 麻痹性口类毒素 膝沟藻毒素 标准样品 高效液相色谱 制备 均匀性 稳定性 不确定度
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 标准研究
• 页码范围: 62-70
• 页数: 9页
• 分类号: S94
• 字数: 5499字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1833.2019.02.007

摘要

口类毒素标准样品的制备是保障口类质量安全的基础,本研究以有毒贻口(Mytilus edulis)为原料,探究麻痹性口类毒素标准样品的制备技术.以1％乙酸溶液提取贻口中的麻痹性口类毒素,采用羟丙基葡聚糖凝胶柱(Sephardex LH20)净化后收集目标馏分,再经高效液相色谱以TSK-GEL Hillic Amide-80色谱柱(4.6 mm×250.0 mm,5.0μm)分离、纯化,根据麻痹性口类毒素的保留时间收集色谱峰流出液,连续制备合并馏分,40℃减压蒸馏浓缩近干,用75％乙腈水(含0.25％甲酸)溶解,即制得毒素标准样品溶液.分别采用四极杆/离子阱复合质谱与标准物质的多级质谱信息进行匹配,以高分辨质谱获得的精确质量数进行定性确证,样品溶液所含的麻痹性口类毒素为4种膝沟藻毒素,分别为膝沟藻毒素-1&-4(Gonyautxins-1&-4,GTX1&4)和膝沟藻毒素-2&-3(Gonyautxins-2&-3,GTX2&3).均匀性实验中,经F检验表明在95％的置信区间范围内样品均匀性良好.稳定性考察实验中,标准样品在4℃和-18℃两种环境条件下储存6个月稳定性较好.标准样品经8家实验室联合定值,并评定了定值结果的不确定度.本研究制得的麻痹性口类毒素标准样品为GTX 1(3663μg/L)&GTX4(1147μg/L)和GTX 2(1884μg/L)&GTX3(797μg/L)的混合溶液,溶剂为75％乙腈水(含0.25％甲酸),为国内口类毒素标准样品研发提供了技术支撑.