紫花苜蓿高温诱导启动子pMsMBF1c的克隆与功能分析

• 作者: 娄芬 张瑜 李小冬 牟琼 莫本田 陈光吉 陈文贵 韩永芬
• 来源期刊: 草业学报
• 关键词: 高温 MBF1c 紫花苜蓿 转基因 启动子
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 128-137
• 页数: 10页
• 字数: 7151字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11686/cyxb2018370

摘要

植物耐热性受复杂而精细的调控.热诱导启动子能经济、高效的激活或关闭耐热调节途径关键基因的表达, 在植物功能基因组研究与现代分子育种技术中起十分重要的作用.以紫花苜蓿耐热候选基因MsMBF1c的编码序列为基础, 采用酶切连接的方法分离获得了其上游1748bp序列, 生物信息学分析发现该区域具有HSE与GA-TA结合位点等2个与植物耐热调节相关的保守模体, 此外还有5个ABA应答元件 (ABRE、MYB2、MIC2、CBF与DPBF) 和2个MYB蛋白结合位点, 说明MsMBF1c除了参与植物耐热性调节外, 还可能参与其他抗逆性调节.构建pBI121-MsMBF1c::GUS双元载体转化野生型拟南芥, 荧光定量分析热诱导后的转基因植物中GUS与AtMBF1c基因的表达发现其分别上调了5.4与4.8倍, 并且高温诱导下转基因植株的组织化学染色分析同样证明MsMBF1c启动子显著受高温诱导.分离获得紫花苜蓿MsMBF1c启动子序列并转化拟南芥, 并且从生物信息学、组织化学染色与基因表达等方面验证该序列能显著被高温诱导, 为探讨紫花苜蓿耐热调控机制及通过分子生物技术改善紫花苜蓿耐热性提供理论支撑, 最终为培育适应南方高温气候条件的紫花苜蓿新品种提供技术储备.